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土壤氨基糖實(shí)驗(yàn)流程如下：一、實(shí)驗(yàn)方法及原理氨基糖在吡啶-甲醇溶液中,以 4-二甲氨基吡啶為催化劑的條件下與鹽酸羥胺和乙酸酐發(fā)生糖腈乙酰酯反應(yīng), 所得衍生物可利用氣相色譜測定。二、實(shí)驗(yàn)步驟2.1主要實(shí)驗(yàn)儀器? ?GC（毛細(xì)管分流進(jìn)樣口， FID檢測器）鼓風(fēng)烘箱（涵蓋105℃，可定時(shí)8h）渦旋混合儀（2850rpm）離心機(jī)（50mL，3650rpm）冷凍干燥機(jī)水浴鍋（45℃、80℃）旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀（100mL，65℃）離心機(jī)（5mL，8000rpm）2.2 實(shí)驗(yàn)步驟1、水解：稱取約0.5~1.0g的土樣于水解管中，沿管壁加入5 mL 6 mol/L鹽酸，用氮?dú)庵脫Q水解管中空氣2min后密封。在烘箱中105℃放置8h水解。2、凈化：a) 除酸：待水解液冷卻至室溫后，加入200μgN-甲基氨基葡萄糖（1mg/mL水溶液，200μL）。渦旋儀震蕩30s混勻。取部分水解液于5mL離心管中，于8000rpm離心1min。取上清液2.5mL于50mL離心管中用氮?dú)庥?5℃吹干。用25mL純水溶解吹干后的殘?jiān)?。?.4mol/LKOH和0.01mol/LHCL調(diào)節(jié)pH至6.6~6.8。b) 除鹽：離心管以3000rpm離心5min，轉(zhuǎn)移出上清液于100mL茄型瓶中，于65℃，25rpm旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)至干。再加入10mL無水甲醇分兩次溶解瓶中殘?jiān)?。后轉(zhuǎn)移至另一50mL離心管。氮吹至5mL以下，渦旋溶解管壁有機(jī)物后，以4000rpm離心5min，除鹽。再將上清液轉(zhuǎn)移到5mL衍生瓶中并加入100μg戊五醇（1mg/mL水溶液，100μL），于40℃氮?dú)獯蹈伞?、標(biāo)準(zhǔn)樣品制備：同時(shí)準(zhǔn)備3個(gè)標(biāo)準(zhǔn)樣品。另取衍生瓶中加入100μL混標(biāo)（1mg/mL的氨基葡萄糖、氨基半乳糖、氨基甘露糖，0.5mg/mL胞壁酸），100μgN-甲基氨基葡萄糖（1mg/mL水溶液，100μL），100μg戊五醇（1mg/mL水溶液，100μL），輕輕搖勻后，與樣品衍生瓶一起吹干。4、衍生：a) 向吹干的樣品和標(biāo)準(zhǔn)樣品的衍生瓶中加入300μL衍生試劑（稱取鹽酸羥胺320mg，4-二甲基氨基吡啶400mg，用吡啶：甲醇=4:1（v:v）溶液溶解稀釋至10ml）后蓋緊。渦旋30s混勻。b) 在80℃水浴35min，每5min震蕩一次。冷卻至室溫后加入1mL醋酐，渦旋30s混勻后，在80℃水浴25min，每5min震蕩一次。衍生管冷卻至室溫后加入1.5mL二氯甲烷，渦旋30s混勻。5、衍生物凈化：a) 往衍生管中加入1mL1mol/LHCL（取6 mol/L鹽酸約17mL，...